一种改良的DNA沉淀法在重组DNA转化大肠杆菌中的应用 |
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作者姓名: | 谭锬 伍金月 唐艺菲 李娜 虞佳 梁前进 |
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作者单位: | 湖南省分子靶标新药研究协同创新中心/南华大学衡阳医学院,421001,湖南衡阳;北京师范大学抗性基因资源与分子发育北京市重点实验室,北京师范大学生命科学学院,100875,北京;湖南省分子靶标新药研究协同创新中心/南华大学衡阳医学院,421001,湖南衡阳;湖南省分子靶标新药研究协同创新中心/南华大学衡阳医学院,421001,湖南衡阳;南华大学蛋白质结构与功能研究所,421001,湖南衡阳;北京师范大学抗性基因资源与分子发育北京市重点实验室,北京师范大学生命科学学院,100875,北京 |
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基金项目: | 国家自然科学基金;湖南省分子靶标新药研究协同创新中心开放基金资助项目;国家大学生创新性实验计划 |
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摘 要: | 以构建pUC18-EGFP载体为例,通过对DNA连接产物进行沉淀处理,对普通的DNA沉淀法进行了改良.实验证明,采用改良的DNA沉淀法处理后的连接产物,转化大肠杆菌的效率约是对照组的10倍,并且大肠杆菌感受态细胞用量减少到10μL.这一改良的DNA沉淀法用CaCl_2替代TE作为溶解沉淀DNA的溶剂,省略了用70%乙醇洗涤DNA沉淀的步骤,较普通的DNA沉淀法操作起来更为简便.
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关 键 词: | 重组DNA DNA沉淀法 转化 大肠杆菌 |
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