重组毕赤酵母产匍枝根霉内切葡聚糖酶Ⅱ的分离纯化及其酶学性质研究 |
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作者姓名: | 程伟 汤斌 李松 |
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作者单位: | 安徽工程大学 微生物发酵安徽省工程技术研究中心,安徽 芜湖,241000 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目 |
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摘 要: | 将来源于匍枝根霉的endoglucanase Ⅱ(egⅡ)在毕赤酵母中实现异源表达,对构建完成的重组毕赤酵母进行高密度发酵,制备目标酶蛋白.发酵液经 Ni 柱分离纯化,得到分子量大小约为38 kDa,比酶活为37.8 IU/mg的蛋白.酶学性质研究表明:该酶最适反应温度为55℃,最适反应 pH 为4.8;Mn2+、Zn2+、Fe2+对egⅡ的酶活力有一定的激活作用,Cu2+对egⅡ酶活有抑制作用,Mg2+、Co2+、Na+和K+等离子对该酶的催化活力没有明显影响;该酶以CMC-Na为底物时其反应米氏常数为2.04 mg/ml.
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关 键 词: | 匍枝根霉 内切葡聚糖酶 分离纯化 酶学性质 |
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