蓝舌病病毒内蒙古分离株VP2基因5′端序列分析及探针制备 |
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作者姓名: | 刘小强 武建强 张丽 李充壁 方天祺 |
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作者单位: | [1]内蒙古大学生物工程中心,呼和浩特010021 [2]内蒙古医院,呼和浩特010021 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(3966002) |
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摘 要: | 从内蒙古巴盟地区分离的蓝舌病病毒株(BTV—NM)提取总RNA,经反转录PCR扩增VP2基因5′端片段,并构建至pGEM—T载体中。序列测定后,将这一序列与蓝舌病毒澳大利亚株VP2基因5′端进行比较分析:同源性为40%。通过PCR法标记克隆的cDNA片段,制备地高辛标记探针,与粗提的蓝舌病发病羊病毒RNA进行Northernblot杂交,并作敏感性试验,结果表明此探针对蓝舌病毒内蒙古分离株具有特异性,可检测出50pg的病毒RNA。
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关 键 词: | 蓝舌病病毒 VP2基因 序列分析 探针 |
文章编号: | 1000-1638(2004)01-0040-04 |
修稿时间: | 2002-09-03 |
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