| 重组刺桐胰蛋白酶抑制剂的制备及活性鉴定 |
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| 引用本文： | 马志峰,孙自勇,陈均勇,刘建宁. 重组刺桐胰蛋白酶抑制剂的制备及活性鉴定[J]. 南京大学学报(自然科学版), 2005, 41(5): 462-469 |
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| 作者姓名： | 马志峰 孙自勇 陈均勇 刘建宁 |
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| 作者单位： | 南京大学分子医学研究所，南京大学分子医学研究所，南京大学分子医学研究所，南京大学分子医学研究所 南京，210093，南京，210093，南京，210093，南京，210093 |
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| 摘 要： | 刺桐胰蛋白酶抑制剂(ETI)是一种Kunitz型胰蛋白酶抑制剂,能够抑制胰蛋白酶及组织型纤溶酶原激活剂的活性,因此ETI可以作为配体与固定相偶联用于亲和层析.利用化学合成及聚合酶链式反应(PCR)的方法获得ETI的编码基因,然后用NdeI/SacI酶切并插入载体pET25b ( )中构建重组表达质粒pET25b ( )/ETI .重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)后,用IPTG诱导使重组ETI(rETI)过量表达形成包涵体.包涵体经过洗涤、复性及CM离子交换柱纯化,每升培养液可获得14 mgrETI ,其纯度超过92 %.活性测定表明,rETI对凝血酶及尿激酶的活性没有抑制作用,但能显著抑制胰蛋白酶、瑞替普酶及纤溶酶的活性,抑制常数Ki分别为5 .14×10-9,9 .4×10-8和2 .08×10-8mol/L.
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| 关 键 词： | 刺桐胰蛋白酶抑制剂（ETI） 胰蛋白酶 瑞替普酶 纤溶酶 抑制 |
| 收稿时间： | 2005-03-25 |
Recombinant Preparation and Characterization of Erythrina Trypsin Inhibitor |
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| Ma Zhi-Feng,Sun Zi-Yong,Chen Jun-Yong,Liu Jian-Ning Institute of Molecular Medicine,Nanjing University,Nanjing,,China). Recombinant Preparation and Characterization of Erythrina Trypsin Inhibitor[J]. Journal of Nanjing University: Nat Sci Ed, 2005, 41(5): 462-469 |
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| Authors: | Ma Zhi-Feng Sun Zi-Yong Chen Jun-Yong Liu Jian-Ning Institute of Molecular Medicine Nanjing University Nanjing China) |
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| Affiliation: | Ma Zhi-Feng,Sun Zi-Yong,Chen Jun-Yong,Liu Jian-Ning Institute of Molecular Medicine,Nanjing University,Nanjing,210093,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Erythrina trypsin inhibitor (ETI) trypsin reteplase plasmin inhibition |
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