人载脂蛋白基因apoAI在毕赤氏酵母中的表达 |
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引用本文: | 张淼,赵志安,杨婷婷,刘林,宋大新.人载脂蛋白基因apoAI在毕赤氏酵母中的表达[J].复旦学报(自然科学版),2004,43(2):181-184,189. |
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作者姓名: | 张淼 赵志安 杨婷婷 刘林 宋大新 |
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作者单位: | 复旦大学生命科学学院,上海200433 |
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摘 要: | 将化学法合成的apoAI基因插入分泌型载体pPIC9K.将重组的pPIC9K—apoAI用BglⅡ酶切后,转化Pichia pastoris GS115菌株,筛选获得G418高抗性转化子.转化子经摇瓶发酵和甲醇诱导,上清液用SDS-PAGE检测,有明显的rApoAI表达.经Phenyl—sepharose 6(Fast Flow)疏水层析柱和Sephadex G-50(coarse)分子筛层析,得到rApoAI蛋白纯品.经Western blotting,N末端氮基酸顺序测定证明,毕赤氏酵母表达的rApoAI与人血浆提取的ApoAI基本一致.
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关 键 词: | 人载脂蛋白ApoAI 分泌型载体 毕赤氏酵母 蛋白质印迹 N末端氨基酸顺序测定 |
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