| 一个新的用于植物转化的双元质粒载体的构建及应用 |
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| 引用本文： | 李旭刚,路子显,冯德江,朱祯.一个新的用于植物转化的双元质粒载体的构建及应用[J].自然科学进展,2001,11(4):368-373. |
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| 作者姓名： | 李旭刚 路子显 冯德江 朱祯 |
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| 作者单位： | 中国科学院遗传研究所, |
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| 基金项目： | 国家"八六三”高技术计划(批准号:Z-17-01-01、BH-02-01-01)、国家自然科学基金(批准号:39989001)国家转基因植物研究与产业化开发专项基金(批准号:ZJY-B-01)资助项目 |
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| 摘 要： | 构建了一个适合农杆菌介导转化的双元T-DNA载体.载体pCNPT-Ⅱ含有与LacZ相连的多克隆位点,其分子量比常用的pBin19载体小了2.6kb.多克隆位点靠近T-DNA的右边界,植物选择标记基因新霉素磷酸转移酶基因靠近T-DNA的左边界,当T-DNA从右边界向左边界依次转移时,使外源基因应先于选择标记基因整合进植物基因组,可以避免产生无外源目的基因的转化植株.以β-葡糖醛酸酶基因作报道基因构建了植物表达载体pCNPT-ⅡGUSA,经农杆菌介导转化了烟草.分子检测表明,在外源目的基因与选择标记基因共整合的频率上,pCNPT-Ⅱ构建的植物表达载体强于pBin19来源的pBI121.
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| 关 键 词： | 双元载体pCNPⅡ 农杆菌β-葡糖醛酸酶 pBin19招薷母邋 |
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