| 三相分离甾短杆菌胆固醇氧化酶及其性质 |
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| 引用本文： | 王龙刚,梁爽,王武.三相分离甾短杆菌胆固醇氧化酶及其性质[J].华东理工大学学报(自然科学版),2007,33(2):190-194,210. |
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| 作者姓名： | 王龙刚 梁爽 王武 |
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| 作者单位： | 江南大学生物工程学院,工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡,214036 |
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| 摘 要： | 三相分离(TPP)是将硫酸铵与叔丁醇混合后形成有机相、中间沉淀相和水相。在20°C,调节发酵上清液的pH至6.0,加入硫酸铵使终浓度为400 g/L,溶解后加入与上清液等体积的叔丁醇,静置1 h分相,胆固醇氧化酶在有机相和水相之间形成蛋白沉淀,12 000 r/min离心10 min收集中间蛋白相,用pH 7.5,10 mmol/L的磷酸缓冲液溶解。结果表明:利用三相分离技术从乳化体系中分离纯化胆固醇氧化酶,比酶活提高了3.49倍,收率达93%。回收的酶液进一步经过DEAE-Sepharose Fast Flow纯化,比酶活从3.56 U/mg提高到30.15 U/mg。该酶最适反应温度为60°C,最适反应pH为7.5,酶的等电点为8.5,该酶在37°C,pH 6.0~8.0较为稳定。Hg2 和Ag 离子完全抑制胆固醇氧化酶的活性。
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| 关 键 词： | 甾短杆菌 胆固醇氧化酶 分离纯化 三相分离 酶学性质 |
| 文章编号： | 1006-3080（2007）02-0190-05 |
| 收稿时间： | 2006-06-28 |
| 修稿时间： | 2006年6月28日 |
Purification and Properties of a Cholesterol Oxidase from Brevibacterium sp. by Three-Phase Partitioning |
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| WANG Long-gang,LIANG Shuang,WANG Wu.Purification and Properties of a Cholesterol Oxidase from Brevibacterium sp. by Three-Phase Partitioning[J].Journal of East China University of Science and Technology,2007,33(2):190-194,210. |
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| Authors: | WANG Long-gang LIANG Shuang WANG Wu |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Brevibacterium sp cholesterol oxidase isolation and purification three-phase partitioning enzyme properities |
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