| 同源引物的非等量PCR |
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| 引用本文： | 上官云杰,梁亚萍,杨昂,程晋生,黄亚威,刘亮伟.同源引物的非等量PCR[J].河南科学,2018(3):326-333. |
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| 作者姓名： | 上官云杰 梁亚萍 杨昂 程晋生 黄亚威 刘亮伟 |
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| 作者单位： | 河南农业大学生命科学学院;农业部农业酶工程重点实验室 |
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| 摘 要： | 为确定引物量对同源引物扩增DNA的影响.将正向引物GFO与同源度为45%、90%、100%、54%、9%的反向引物CR1、CR2、CR3、CR4、CR5分别用于扩增5.9 kb p ET20b-C2-G10-C2模式DNA.等量引物(500 nmol/L)时,CR3和CR4均无法扩增目的条带.而非等量PCR时,将反向引物量降低10倍(50 nmol/L),CR3和CR4均扩增出目的条带,即正向引物量降低10倍时,五对引物均扩增出目的条带.CR3降低100倍、CR4降低10倍扩增DNA最多,经15~20次循环五对引物扩增DNA最多.实验结果表明,非等量PCR通过降低单侧引物量减少引物二聚体形成,从而扩增双链DNA.
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| 关 键 词： | 非等量 同源引物 PCR DNA |
Homologous Primer Unequal PCR |
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