| 重组枯草芽孢杆菌谷氨酰胺合成酶蛋白在改良M9培养基中的诱导表达 |
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| 引用本文： | 刘顺谊,殷志敏. 重组枯草芽孢杆菌谷氨酰胺合成酶蛋白在改良M9培养基中的诱导表达[J]. 南京师大学报(自然科学版), 2007, 30(4): 74-79 |
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| 作者姓名： | 刘顺谊 殷志敏 |
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| 作者单位： | 南京师范大学生命科学学院,江苏南京210046 |
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| 基金项目： | 教育部留学回国人员科研启动基金 , 南京师范大学校科研和教改项目 |
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| 摘 要： | 以重组枯草芽孢杆菌谷氨酰胺合成酶(L-谷氨酸:氨连接酶,Glutamine Synthetase, GS EC 6.3.1.2)蛋白表达宿主菌株BL21(DE3) (pET3C/谷氨酰胺合成酶)作为研究对象,借助SDS PAGE分析方法,对于用乳糖诱导由T7lac启动子控制的重组目的产物蛋白的各种基本参数进行了初步的研究.研究了最佳本底培养基、最佳碳源及其最佳添加比例、碳源与诱导物的最适组合,并探索了适用于改良型培养基的诱导参数.实验结果表明,对于重组目的产物蛋白,改良型M9培养基完全可以替代LB培养基;以甘油为碳源,可以避免葡萄糖对T7lac启动子的屏蔽作用.以乳糖为诱导物,目的蛋白的表达量、可溶性及酶活与以IPTG为诱导物基本接近.研究结果为酶法合成谷氨酰胺的工业化生产提供了一定的参考.
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| 关 键 词： | 谷氨酰胺合成酶 改良M9培养基 原核表达 重组枯草芽孢杆菌 谷氨 酰胺合成 酶蛋白 改良型 培养基 诱导表达 Medium Glutamine Synthetase Bacillus Subtilis Recombinant Expression 工业化生产 酶法合成 IPTG 酶活 可溶性 表达量 乳糖 屏蔽作用 |
| 文章编号： | 1001-4616（2007）04-0074-06 |
| 收稿时间： | 2007-03-04 |
| 修稿时间： | 2007-05-08 |
Induced Expression of Recombinant Bacillus Subtilis Glutamine Synthetase in Optimized M9 Medium |
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| Liu Shunyi,Yin Zhimin. Induced Expression of Recombinant Bacillus Subtilis Glutamine Synthetase in Optimized M9 Medium[J]. Journal of Nanjing Normal University(Natural Science Edition), 2007, 30(4): 74-79 |
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| Authors: | Liu Shunyi Yin Zhimin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Glutamine Synthetase optimized M9 medium prokaryotic expression |
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