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AsiaⅠ型口蹄疫病毒基因工程多肽疫苗的构建及其免疫原性分析
引用本文:韩姬,王加龙,焦晔,刘明秋,严维耀,郑兆鑫.AsiaⅠ型口蹄疫病毒基因工程多肽疫苗的构建及其免疫原性分析[J].复旦学报(自然科学版),2008,47(5).
作者姓名:韩姬  王加龙  焦晔  刘明秋  严维耀  郑兆鑫
作者单位:复旦大学,生命科学学院,遗传工程国家重点实验室,上海,200433
基金项目:上海市国内科技合作资助项目 
摘    要:为了构建Asia Ⅰ型口蹄疫病毒多肽疫苗,用反转录PCR方法扩增VPI基因并测得该基因的核苷酸序列.将VPI(133AA-163AA)、VP2(1AA~33AA)抗原表位基因分别与卢一半乳糖苷酶基因(简称LacZ')3’末端相连构建表达质粒LacZ’-VIP和LacZ’-VP2.化学合成VP1(133AA~163AA)-VP2(1AA~33AA)-VPl(133AA~163AA)串联重复抗原表位DNA,然后分别连接在β-半乳糖苷酶基因和IgG重链恒定区基因的3’末端,构建两种重组表达质粒LacZ’-VPl(133AA--163AA)-VP)2(1AA~33AA)-VP1(133AA-163AA)(命名为pTl)和IgGvPl(133AA~163AA)-VP2(1AA~33AA)-VPl(133AA-163AA)(命名为pT2).通过Westernblot、血清中和抗体效价测定、T细胞增殖反应及豚鼠抗病毒保护实验分析所构建疫苗的免疫原性及有效性.结果显示pT1、pT2表达的融合蛋白能够诱发豚鼠产生较高的中和抗体及刺激豚鼠T细胞增殖.pT1、pT2两种融合蛋白分别2次免疫豚鼠后,100%的豚鼠能抵抗100 ID50 AsiaⅠ型口蹄疫病毒攻击.pT2融合蛋白1次免疫豚鼠后70%的豚鼠能抵抗100 ID50 AsiaⅠ型口蹄疫病毒攻击.

关 键 词:FMDV  Asia  Ⅰ型  抗原表位  重组多肽疫苗
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