多反应监测结合重组蛋白和18O同位素标记对脂肪合成代谢通路进行蛋白质相对定量的新方法 |
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引用本文: | 张弛,洪杰,张永谦,邓玉林.多反应监测结合重组蛋白和18O同位素标记对脂肪合成代谢通路进行蛋白质相对定量的新方法[J].北京理工大学学报,2017,37(S1):29-34. |
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作者姓名: | 张弛 洪杰 张永谦 邓玉林 |
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作者单位: | 北京理工大学 生命学院, 北京 100081,北京理工大学 生命学院, 北京 100081,北京理工大学 生命学院, 北京 100081,北京理工大学 生命学院, 北京 100081 |
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基金项目: | 国家自然科学青年基金资助项目(21402008) |
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摘 要: | 建立了多反应监测结合肽段串联体蛋白(concatamers of Q peptides,QconCATs)和18O同位素标记对脂肪合成代谢通路的蛋白质进行相对定量的新方法.挑选待检测蛋白的特异性肽段构建QconCAT质粒并将其转化导入大肠杆菌体系后进行表达.通过优化对QconCAT蛋白的酶切条件及考察18O标记效率.建立脂肪合成代谢通路蛋白多反应监测的蛋白质相对新定量方法,并对肥胖大鼠与正常大鼠脂肪代谢通路的蛋白质进行定量分析.结果发现脂肪合成通路的丙二酸单酰辅酶A-ACP转移酶,烯酰-ACP还原酶表达量均有显著上升(P<0.05).该结论与之前报道肥胖相关的文献结果吻合,证明了本方法在定量生物样品应用中的可靠性.
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关 键 词: | 定量串联体蛋白QconCAT 18O同位素标记 多反应监测 |
收稿时间: | 2016/11/19 0:00:00 |
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