| 构建的FIt3L胞外域原核表达载体在大肠杆菌中的表达 |
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| 引用本文： | 卢宏松,徐丽慧,施焕敬,韩捷,何贤辉.构建的FIt3L胞外域原核表达载体在大肠杆菌中的表达[J].暨南大学学报,2008,29(4). |
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| 作者姓名： | 卢宏松 徐丽慧 施焕敬 韩捷 何贤辉 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，生物化学与分子生物学广东省重点学科资助项目 |
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| 摘 要： | 目的:构建含组氨酸标签的FMS样酪氨酸激酶3配体(Fms-like tyrosine kinase 3 ligand,FIt3L)胞外域蛋白的原核表达载体,并在大肠杆菌中进行表达.方法:依据FIt3L基因序列设计引物,以RT-PCR的方法从小鼠脾脏总RNA中克隆FIt3L基因并构建其胞外域原核表达载体,测序鉴定后在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中诱导表达,用免疫印迹鉴定.结果:克隆到FIt3L编码区全长序列,经DNA测序证明与已报道的序列相同;构建羧基端带有His6标签的FIt3L胞外域蛋白的原核表达载体,转化大肠杆菌后SDS-PAGE分析显示在BL21(ED3)中获得较高表达;免疫印迹分析表明IPTG诱导后表达的FIt3L胞外域蛋白的相对分子质量(Mr)为19 000,与理论值相符,此蛋白与抗His6标签的抗体发生特异性反应.结论:成功克隆FIt3L基因,构建其胞外域蛋白的原核表达载体,并在大肠杆菌中获得表达.
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| 关 键 词： | FMS样酪氨酸激酶3配体 胞外域 原核表达 组氨酸标签 |
Construction of prokaryotic expression plasmid for Fit3 ligand extracellular domain and its expression in Escherichia coli |
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| LU Hong-song,XU Lihui,SHI Huan-jing,HAN Jie,HE Xian-hui.Construction of prokaryotic expression plasmid for Fit3 ligand extracellular domain and its expression in Escherichia coli[J].Journal of Jinan University(Natural Science & Medicine Edition),2008,29(4). |
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| Authors: | LU Hong-song XU Lihui SHI Huan-jing HAN Jie HE Xian-hui |
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