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酿酒酵母蔗糖酶基因的克隆、异源表达及重组酶学性质研究
引用本文:杜丽琴,杨键,朱绮霞,杨登峰,韦宇拓,黄日波.酿酒酵母蔗糖酶基因的克隆、异源表达及重组酶学性质研究[J].广西科学,2008,15(2):184-188.
作者姓名:杜丽琴  杨键  朱绮霞  杨登峰  韦宇拓  黄日波
作者单位:1. 广西大学生命科学与技术学院,广西南宁,530004
2. 广西科学院,广西南宁,530007
基金项目:广西科技攻关项目 , 广西科学基金 , 广西大学校科研和教改项目
摘    要:以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到蔗糖酶基因(suc2),并将其克隆到表达载体pSE380中,将得到的重组质粒pSE-suc2转化进E.coli BL21中,利用镍金属螯合层析方法分析测定其酶学性质。重组菌株的SDS-PAGE结果显示重组蔗糖酶基因(suc 2)有60kDa目的蛋白出现,纯化的SDS-PAGE分析得到均一的蛋白条带;重组蔗糖酶的Km值为47.73mmol/L,最大反应速率为79.59mg还原糖mg-1蛋白min-1,最适温度为42℃,最适pH值为5.5,Zn2 、Cu2 对重组蔗糖酶酶活有较强的抑制作用,Ba2 、Mg2 、Mn2 对重组蔗糖酶酶活稍有激活作用。

关 键 词:蔗糖酶  克隆  表达  酶学性质
文章编号:1005-9164(2008)02-0184-05
收稿时间:2007/11/12 0:00:00
修稿时间:2007年11月12

Cloning, Expression and Characterization of Gene Encoding Invertase from Saccharomyces cerevisiae
DU Li-qin,YANG Jian,ZHU Qi-xi,YANG Deng-feng,WEI Yu-tuo and HUANG Ri-bo.Cloning, Expression and Characterization of Gene Encoding Invertase from Saccharomyces cerevisiae[J].Guangxi Sciences,2008,15(2):184-188.
Authors:DU Li-qin  YANG Jian  ZHU Qi-xi  YANG Deng-feng  WEI Yu-tuo and HUANG Ri-bo
Institution:College of Life Science and Technology, Guangxi University, Nanning, Guangxi, 530004, China,College of Life Science and Technology, Guangxi University, Nanning, Guangxi, 530004, China,College of Life Science and Technology, Guangxi University, Nanning, Guangxi, 530004, China,Guangxi Academy of Sciences, Nanning, Guangxi, 530007, China,College of Life Science and Technology, Guangxi University, Nanning, Guangxi, 530004, China and Guangxi Academy of Sciences, Nanning, Guangxi, 530007, China
Abstract:
Keywords:invertase  cloning  expression  characterization
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