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杨小舟蛾MtroOBP1基因的克隆、序列分析及表达
引用本文:张雨,丰凯,汤方. 杨小舟蛾MtroOBP1基因的克隆、序列分析及表达[J]. 南京林业大学学报(自然科学版), 2020, 44(5): 215-221. DOI: 10.3969/j.issn.1000-2006.201909017
作者姓名:张雨  丰凯  汤方
作者单位:南京林业大学,南方现代林业协同创新中心,南京林业大学林学院,江苏 南京 210037;南京林业大学,南方现代林业协同创新中心,南京林业大学林学院,江苏 南京 210037;南京林业大学,南方现代林业协同创新中心,南京林业大学林学院,江苏 南京 210037
基金项目:江苏省自然科学基金项目(BK20151517);江苏高校优势学科建设工程资助项目(PAPD)
摘    要:【目的】气味结合蛋白(odorant binding proteins,OBPs)是一种嗅觉相关的蛋白,该蛋白参与大多数气味分子的识别过程,并与气味分子相结合。获得杨小舟蛾[Micromelalopha troglodyta (Graeser)]OBPs以明确其特性。【方法】选择羽化后健康的杨小舟蛾触角为模板,通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术克隆杨小舟蛾MtroOBP1基因,利用生物信息学分析软件研究其基因序列和蛋白结构,运用实时荧光定量PCR(qPCR)技术研究MtroOBP1的组织表达模式。【结果】利用RT-PCR技术从杨小舟蛾触角总RNA中扩增得到MtroOBP1基因(GenBank登录号:MN056510),序列分析表明,MtroOBP1开放阅读框为777 bp,一共编码了258个氨基酸残基,且翻译的氨基酸序列仅含有4个保守的半胱氨酸位点,表明得到的OBP基因的编码蛋白不属于典型气味结合蛋白家族,而是属于Minus-C家族。蛋白质理化性质预测显示:MtroOBP1蛋白的分子量为29 664.57 u,等电点为6.23,有18个潜在的磷酸化位点,没有明显的跨膜区,疏水指数为-2.011~3.078,有一个由19个氨基酸组成的信号肽,说明为分泌型蛋白。组织表达模式表明MtroOBP1在杨小舟蛾的各部位都表达,但在触角中表达量最高。【结论】首次克隆得到杨小舟蛾MtroOBP1基因,在触角中高表达,推测其蛋白具有运输气味分子的功能,在杨小舟蛾的嗅觉识别中起着至关重要的作用。

关 键 词:杨小舟蛾  MtroOBP1基因  基因克隆  嗅觉系统  组织表达谱
收稿时间:2019-09-09

The cloning,sequence analysis and expression of MtroOBP1 gene in Micromelalopha troglodyta(Graeser)
Abstract:
Keywords:Micromelalopha troglodyta   MtroOBP1 gene  gene cloning  olfactory system  expression profiling  
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