鸽子DHX36解旋酶表达纯化及酶学特性分析 |
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引用本文: | 谢思曼,戴阳雪,刘娜女,奚绪光.鸽子DHX36解旋酶表达纯化及酶学特性分析[J].内蒙古大学学报(自然科学版),2020,51(5):501-508. |
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作者姓名: | 谢思曼 戴阳雪 刘娜女 奚绪光 |
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作者单位: | 西北农林科技大学生命科学学院,陕西杨凌712100;西北农林科技大学生命科学学院,陕西杨凌712100;西北农林科技大学生命科学学院,陕西杨凌712100;西北农林科技大学生命科学学院,陕西杨凌712100 |
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基金项目: | 国家自然科学基金;国家自然科学基金 |
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摘 要: | 利用生物化学与生物物理学前沿技术系统地分析了鸽子(Columba livia)DHX36解旋酶的酶学特性。通过原核表达纯化系统获得了纯度大于95%的ClDHX36蛋白。利用荧光各向异性法研究ClDHX36的底物结合偏好性,结果表明ClDHX36偏好结合ssRNA、ssDNA和G4,并且优先结合序列中富含鸟嘌呤的ssDNA。通过快速停留光谱技术探索ClDHX36的解旋活性,明确了ClDHX36解旋方向性为3′-5′,更倾向于解旋尾链为Grich和G4的dsDNA底物,且ClDHX36的解旋活性与底物的尾链长度呈负相关性。本研究揭示了ClDHX36在结合和解旋底物过程中均具有明显的底物偏好性,为深入研究DHX36的工作机理提供参考。
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关 键 词: | 鸽子DHX36 蛋白表达纯化 结合活性 解旋活性 |
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