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pEGFP-N1/PDX1真核载体的构建与表达
引用本文:唐小龙,郭敏,张洹,朱康儿. pEGFP-N1/PDX1真核载体的构建与表达[J]. 暨南大学学报(自然科学与医学版), 2008, 29(2): 121-124
作者姓名:唐小龙  郭敏  张洹  朱康儿
作者单位:暨南大学医学院血液病研究所,广东,广州,510632
基金项目:国务院侨办重点学科建设基金
摘    要:目的: 构建胰腺十二指肠同源框蛋白1 (pancreatic and duodenal homeobox factor 1, Pdx1)转录因子真核表达质粒,并检测其在真核细胞中的表达能力及其生物活性.方法:以人胚胎胰腺组织基因组的mRNA为模板经RT-PCR扩增获得Pdx1基因编码序列,克隆到真核表达载体pEGFP-N1的多克隆位点中,构建pEGFP-N1/Pdx1真核表达质粒,并转染L02细胞,用RT-PCR、免疫组化、间接荧光法和Western Blot检测目的基因表达情况.结果:酶切与测序结果表明目的基因序列克隆正确;RT-PCR检测目的基因Pdx1 mRNA在靶细胞L02中表达;免疫组化和间接荧光结果证实Pdx1主要存在于细胞核内;Western blot检测到细胞核内Pdx1目的蛋白.结论:完成人Pdx1基因克隆,成功构建了目的基因Pdx1真核表达载体,并在L02细胞中获得有效表达.

关 键 词:胰腺十二指肠同源框蛋白1  质粒  转录因子  内切酶
文章编号:1000-9965(2008)02-0121-04
修稿时间:2007-12-19

Construction and expression of eukaryotic expression vector of pEGFP-N1/PDX1
TANG Xiao-long,GUO Ming,ZHANG Yuan,ZHU Kang-er. Construction and expression of eukaryotic expression vector of pEGFP-N1/PDX1[J]. Journal of Jinan University(Natural Science & Medicine Edition), 2008, 29(2): 121-124
Authors:TANG Xiao-long  GUO Ming  ZHANG Yuan  ZHU Kang-er
Abstract:
Keywords:
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