Pyrococcus furiosus小分子热休克蛋白Pfu-sHSP的克隆表达和纯化 |
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引用本文: | 陈华友,谭小力,张志燕,褚仲梅.Pyrococcus furiosus小分子热休克蛋白Pfu-sHSP的克隆表达和纯化[J].信阳师范学院学报(自然科学版),2009,22(1). |
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作者姓名: | 陈华友 谭小力 张志燕 褚仲梅 |
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作者单位: | [1]江苏大学生命科学研究院,江苏镇江212013 [2]中国科学院上海生命科学研究院,上海200233 |
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摘 要: | 用PCR扩增嗜高温菌Pyrococcus furiosus的小分子热休克蛋白基因后,克隆于质粒p17473中.该小分子热休克蛋白Pfu-sHSP含有较多的稀有密码子,在大肠杆菌BL21(DE),几乎无表达,而在带有大肠杆菌稀有密码子AGA(arg)AGG(arg),AUA(ile)和CUA(1eu)的BL21--Codonplus(BE)3-RIL中能大量表达.大量表达Pfu-sHSP蛋白的细胞用超声波破碎后,离心沉淀用85℃水浴20min,再离心,上清液再以Q Sepha—rose Fast Flow阴离子交换和S-200凝胶过滤层析进一步纯化,可以得到90%以上的蛋白.
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关 键 词: | 小分子热休克蛋白 Pyrococcus furiosus 分子伴侣 |
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