琼脂糖电泳凝胶中回收微量DNA片段的新方法 |
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引用本文: | 谭艳平,杨玖英,朱英国,刘学群,王春台. 琼脂糖电泳凝胶中回收微量DNA片段的新方法[J]. 中南民族大学学报(自然科学版), 2004, 23(1): 10-14 |
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作者姓名: | 谭艳平 杨玖英 朱英国 刘学群 王春台 |
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作者单位: | 1. 中南民族大学化学与生命科学学院生物技术国家民委重点实验室,武汉,430074 2. 武汉大学生命科学学院植物发育生物学教育部重点实验室,武汉,430072 3. 中南民族大学化学与生命科学学院生物技术国家民委重点实验室,武汉,430074;武汉大学生命科学学院植物发育生物学教育部重点实验室,武汉,430072 |
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基金项目: | 国家重点基础研究发展计划(973计划),湖北省科技攻关项目 |
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摘 要: | 对现有的DNA片段回收方法进行了改进.琼脂糖凝胶中目的DNA片段条带切割后,浸入适量的TE溶液(0.2~0.4 mL/g 琼脂糖胶),在37 ℃水浴保温15 min,以溶出凝胶中的DNA,利用相应的引物对浸出的微量DNA样品进行与原PCR反应相同条件下的PCR扩增,直接用75 %乙醇沉淀后,适量TE溶解得到回收的目的DNA样品.此法回收的DNA片段可用于分子克隆,特别是适用于TA载体的克隆与测序,适合大批量微量样品的准确回收,防止了因试剂盒回收造成的微量DNA片段的丢失.
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关 键 词: | 琼脂糖凝胶电泳 DNA片段 回收 正交实验法 聚合酶链式反应 |
文章编号: | 1672-4321(2004)01-0010-04 |
修稿时间: | 2004-01-15 |
New and Simple Method for Recovery of Trace DNA Fragments from Normal Agarose Gel |
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Abstract: | |
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Keywords: | agarose gel electrophoresis DNA recovery orthogonal design PCR |
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