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人乳头瘤病毒16和52型双荧光等温多自配引发扩增的检测方法
作者姓名:崔玉伟  牟颖  马莉  丁雄  方宗宇  王焰  吴青青
作者单位:贵州医科大学附属医院中心实验室;浙江大学工业控制技术国家重点实验室智能系统与控制研究所分析仪器研究中心
摘    要:应用等温多自配引发扩增(IMSA)技术,分别针对人乳头瘤病毒(HPV)16型的E7和52型的E6基因序列设计6条特异性引物,并在检测体系中加入羟基萘酚蓝(HNB)和SYBR GreenⅠ的混合双荧光指示剂,建立快速检测人乳头瘤病毒的双荧光IMSA方法.结果表明:340μmol/L HNB与1∶10 000SYBR GreenⅠ混合构建的双荧光指示剂在IMSA反应体系中具有明确的指示效果,455nm蓝光激发下阳性反应管双荧光显色为黄绿色,阴性反应管双荧光显色为橘红色;该方法对HPV16和HPV52型检测限分别达60,600拷贝/μL,可特异性检出样品中HPV16和HPV52,与临床检测结果比对无差异.

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