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| 东方蜜蜂微孢子虫环介导恒温扩增检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 何美妍,史红霞,宋珍珍,党晓群 .东方蜜蜂微孢子虫环介导恒温扩增检测方法的建立 [J].重庆师范大学学报(自然科学版),2016(6):13-18. |
| 作者姓名： | 何美妍 史红霞 宋珍珍 党晓群 |
| 作者单位： | 重庆师范大学 昆虫病原生物学实验室,重庆401331 |
| 摘 要： | 以从重庆酉阳分离到的东方蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae)为研究对象,以该物种16SrDNA作为靶标,设计引物并采用环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术检测东方蜜蜂微孢子虫。实验结果显示,LAMP检测的最佳条件为内引物浓度5μmol·L-1,聚合酶用量800U;以研究对象16SrDNA质粒为模板,LAMP检测的最低质量浓度为1.735×10-2ng·μL-1,PCR检测的最低质量浓度为1.735×10-1ng·μL-1;以研究对象基因组DNA为模板,LAMP检测的最低质量浓度为1.475×10-3ng·μL-1,PCR检测的最低质量浓度为1.475×10-1ng·μL-1;以研究对象基因组DNA、正常中蜂(Apis cerana)中肠基因组DNA、正常意蜂(Apis mellifera ligustica)中肠基因组DNA、正常家蚕(Bombyx mori)中肠基因组DNA、蜜蜂球囊菌(Ascosphaera a pis)孢子基因组DNA和中蜂囊状幼虫病毒cDNA作为模板进行检测,其中只有以研究对象基因组DNA为模板时,LAMP扩增才有条带。以上研究提示具有高灵敏度和高特异性的LAMP检测方法是东方蜜蜂微孢子虫检测的一个有效工具,可为后期在养蜂场建立快速有效的检测工具奠定基础。 |
| 关 键 词： | 东方蜜蜂微孢子虫 环介导等温扩增 16SrDNA 分子检测 |
Rapid Detection of Nosema ceranae by Loop-mediated Isothermal Amplification Assay |
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| HE Meiyan,SHI Hongxi,SONG Zhenzhen,DANG Xiaoqun .Rapid Detection of Nosema ceranae by Loop-mediated Isothermal Amplification Assay [J].Journal of Chongqing Normal University:Natural Science Edition,2016(6):13-18. |
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| Authors: | HE Meiyan SHI Hongxi SONG Zhenzhen DANG Xiaoqun |
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