熊猫豆β—D—半乳糖苷酶的基本性质研究

经硫酸铵分级分离，DEAE－cellulose 52,CM-cellulose 52和Sephacryl S 100HR凝胶过滤层析方法从熊猫豆黄化苗中获得了一种β－D－半乳糖苷酶，活性收率为8．0％，纯化倍数为245。经PAGE显示单一蛋白着色带，用IEF－PAGE测定其PI为4．1。SES－PAGE显示2条蛋白着色带，其相应分子量分别为40kD和29kD.Sephadex G200层析法测得表观分子量为68kD，以ONPG和PNPG为底物测得该酶的表观Km分别为3.02mmol/L和0．33mmol/L。最适pH为4．2，最适温度为52℃。以乳糖为底物测得表观Km为43mmol/L.HgCI2,DTNB,NEMI,半乳糖和乳糖对酶表现出不同的抑制作用。对某些金属离子和化学修饰剂对酶活性的影响也进行了探讨。