弹性蛋白样多肽融合胸腺肽α1的原核表达方法 |
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作者姓名: | 刘宇 吴喆 寻晓红 向阳 聂东宋 |
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作者单位: | 湖南理工学院,湖南岳阳414006 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(30971570),湖南省教育厅青年基金项目(07B029) |
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摘 要: | 目的建立一种低成本生产胸腺肽α1(Tα1)的方法。方法采用融合表达方式表达Tα1基因,通过人工合成α1和弹性蛋白多肽(ELP)基因,构建Tα1—G—E12n/pET41a(+),同时构建RimJ—pACYCDuetl载体,共转BL21,采用自诱导表达培养基进行蛋白表达,表达蛋白通过变温自动聚合沉淀获得高纯度融合蛋白,将融合蛋白羟胺裂解,变温沉淀,收集上清,最终获得目标蛋白。结果IL培养基最终获得纯度为98%的目标蛋白29.5mg。结论建立了一种不需色谱和亲和纯化的生产胸腺肽α1的方法。
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关 键 词: | 胸腺肽α1 融合表达 纯化 |
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