| 结核分支杆菌H37Rv莽草酸脱氢酶基因的克隆、表达及酶学性质的研究 |
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| 引用本文： | 于海东,张雪莲,王宝林,雷建强,曹健,淳于利娟,许云敏,王洪海.结核分支杆菌H37Rv莽草酸脱氢酶基因的克隆、表达及酶学性质的研究[J].复旦学报(自然科学版),2004,43(2):195-199,205. |
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| 作者姓名： | 于海东 张雪莲 王宝林 雷建强 曹健 淳于利娟 许云敏 王洪海 |
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| 作者单位： | 复旦大学,生命科学学院,遗传学研究所,遗传工程国家重点实验室,上海,200433;郑州工程学院,生物工程系,郑州,450052;复旦大学,生命科学学院,遗传学研究所,遗传工程国家重点实验室,上海,200433;郑州工程学院,生物工程系,郑州,450052 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划)，国家自然科学基金，上海市科委资助项目，2002CB512804，30270072，02DJ14002，，， |
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| 摘 要： | 以结核分支杆菌H37Rv基因组为模板,扩增了该菌株的莽草酸脱氢酶基因aroE,通过在大肠杆菌BL21(DE3)pLYS中表达,纯化出可溶性的重组结核分支杆菌莽草酸脱氢酶(SD). 对其酶学性质测定分析表明:在辅酶NADPH作用下该酶可催化还原3-脱氢莽草酸生成莽草酸,最适pH值为11,最适温度为63 ℃,比活性8.26×104 U/mg. Mg2+,Ni2+,Zn2+等金属离子及NP40、TritonX-100等变性剂对其酶活有一定的促进作用,而SDS则强烈抑制该酶活性. 应用圆二色仪初步测定了重组蛋白的二级结构,重组SD的二级结构中大约有29.2%的α螺旋,9.3%β折叠,32.7%β转角,28.8%无规卷曲. 结核分支杆菌H37Rv莽草酸脱氢酶基因的克隆,为该酶的晶体结构分析、免疫学研究及抗结核药物靶点的筛选奠定基础.
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| 关 键 词： | 结核分支杆菌H37Rv 莽草酸途径 莽草酸脱氢酶SD |
| 文章编号： | 0427-7104(2004)02-0195-05 |
Cloning and Expression of Shikimate Dehydrogenase Gene from Mycobacterium tuberculosis H37Rv and Properties of the Recombinant Shikimate Dehydrogenase |
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| YU Hai-dong.Cloning and Expression of Shikimate Dehydrogenase Gene from Mycobacterium tuberculosis H37Rv and Properties of the Recombinant Shikimate Dehydrogenase[J].Journal of Fudan University(Natural Science),2004,43(2):195-199,205. |
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| Authors: | YU Hai-dong |
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| Institution: | YU Hai-dong~ |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Mycobacterium tuberculosis H37Rv shikimate pathway shikimate dehydrogenase SD |
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