人甲状旁腺素在甲醇毕赤酵母中的分泌表达 |
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引用本文: | 王旭,李霜,刘志斌,何冰芳. 人甲状旁腺素在甲醇毕赤酵母中的分泌表达[J]. 南京工业大学学报(自然科学版), 2004, 26(4): 45-48 |
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作者姓名: | 王旭 李霜 刘志斌 何冰芳 |
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作者单位: | 南京工业大学,制药与生命科学学院,江苏,南京,210009;南京工业大学,制药与生命科学学院,江苏,南京,210009;南京工业大学,制药与生命科学学院,江苏,南京,210009;南京工业大学,制药与生命科学学院,江苏,南京,210009 |
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摘 要: | 选用酵母偏爱的密码子,人工合成长度为282bp的人甲状旁腺素(hFTH)基因,将其克隆于M13载体中,DNA测序验证正确。通过PCR从含有hFTH基因的M13载体获得了该基因,将其插入到含有AOX1启动子和α因子信号肽序列的表达载体pPIC9K中,构建了重组质粒pPIC9K-hFTH,电击法转化甲醇毕赤酵母(Picha pastoris)GS115菌株,经G418筛选得到高拷贝转化子,甲醇诱导表达,Tricine-SDS-PAGE电泳结果表明在9.3kDa处有明显的诱导蛋白带,与报道的hFTH的相对分子质量相近;酶联免疫沉淀法(ELISA)检测证明表达的蛋白具有hFTH免疫活性为132ng/L。
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关 键 词: | 甲状旁腺素 毕赤酵母 重组质粒 分泌表达 |
文章编号: | 1671-7643(2004)04-0045-04 |
修稿时间: | 2003-09-12 |
Secreted expression of human parethyroid hormone(1-84) in Pichia pastoris |
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