基于整体柱的固定化胰蛋白酶反应器及其在水解β-乳球蛋白中的应用

采用胰蛋白酶水解β-乳球蛋白备受关注。然而，该酶成本高昂，无法在食品工业中得到广泛应用。固定化不仅可提高游离酶的稳定性还可通过重复使用降低其成本。本研究分别采用2.1与6 μm的大孔有机整体柱为载体，通过共价固定制备固定化胰蛋白酶反应器 (monolith based immobilized trypsin reactors, MITRs) ，并比较了不同还原剂对固定化得率及酶比活的影响。相较于氰基硼酸，以2-甲基吡啶硼烷为还原剂的固定化方案虽提高了酶的比活，但导致固载量减少了32—50%。此外，孔径大小对酶的比活无显著影响。MITRs可有效水解β-乳球蛋白，且水解效率随着循环流速的增加而提高。其中使用2.1 μm-MITR的水解产物主要为分子量小于3 KDa的小肽。在18次重复实用过程中，6 μm-MITRs表现出更高的稳定性。