PCR-ELISA和PCR-PAGE法检测血液肿瘤细胞株的端粒酶活性 |
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引用本文: | 何冬梅,张洹. PCR-ELISA和PCR-PAGE法检测血液肿瘤细胞株的端粒酶活性[J]. 暨南大学学报(自然科学与医学版), 2003, 24(2): 42-45 |
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作者姓名: | 何冬梅 张洹 |
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作者单位: | 暨南大学医学院血液病研究所,广东,广州,510632 |
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基金项目: | 广州市科技计划重点基金资助项目(2001-Z-037-01) |
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摘 要: | 目的:通过端粒酶聚合酶链反应—酶联免疫测定(PCR—ELISA)和聚合酶链反应—聚丙烯酰胺凝胶电泳(PCR—PAGE)方法检测血液肿瘤细胞株HL—60、K562、Raji的端粒酶活性,探讨其临床应用价值。方法:PCR—ELISA方法是将端粒重复序列PCR变性产物与地高辛标记且对端粒重复片段特异的探针杂交,杂交产物通过ELISA进行测定。PCR—PAGE法是将端粒重复序列PCR产物直接进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,通过硝酸银染色测定端粒酶活性。结果:在端粒酶PCR—ELISA方法检测中,PCR在25-35次循环之间,吸光度A值与循环次数呈线性关系,35-45次循环己达到平台期。PCR—ELISA法检测显示HL—60、K562、Raji细胞均表达高水平的端粒酶活性,吸光度A均值分别为2.362、2.336、2.145。对HL—60、K562、Raji细胞的端粒重复序列扩增的PCR产物直接进行PAGE电泳、银染均呈现3条以上间隔6bP的特征性阶梯状条带。结论:对端粒重复序列PCR产物可同时进行ELISA检测和PAGE—银染,两种方法均可用于恶性肿瘤的临床诊断,ELISA法更为灵敏而简单,且可相对定量。
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关 键 词: | 端粒酶 聚合酶链反应 酶联免疫测定 聚丙烯酰胺凝胶电泳 |
文章编号: | 1000-9965(2003)02-0042-04 |
修稿时间: | 2002-12-12 |
Detecting telomerase activity in malignant hematological cells by PCR- ELISA and PCR- PAGE |
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Abstract: | |
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Keywords: | telomerase polymerase chain reaction enzyme-linked immunoassay polyacrylamide gel electrophoresis |
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