摘 要: | 为评价甲基营养型芽孢杆菌SJ80与SJ81对马铃薯疮痂病的生防潜力,以疮痂链霉菌为指示菌,测试了其发酵上清液的理化稳定性,并与咯菌腈、辛菌胺醋酸盐2种农药进行对比,检测其粗提物的生物安全性和抑菌效果。采用牛津杯法抑菌试验,以抑菌直径测试SJ80与SJ81发酵液的最佳发酵时间,发酵上清液经不同温度、紫外照射、pH值及蛋白酶处理后,以抑菌率测试其稳定性,采用MTT法测定粗提物体外急性细胞毒性。结果表明:2种发酵上清液最佳发酵时间为3 d,经121 ℃处理30 min或紫外照射24 h后,抑菌率均高于90%;SJ81在pH=1~13的抑菌率保持在80%以上,有较好稳定性,SJ80在pH=1~11的抑菌趋势与SJ81的相似,在pH=13的抑菌率为0,耐碱性较弱;发酵上清液经碱性蛋白酶与胰蛋白酶处理2 h后,抑菌率均接近100%,对酶处理较稳定。体外急性毒性实验结果显示,SJ80、SJ81对 LO2细胞增殖的半数抑制量(IC50)分别为239,137 mg/L,对PC12细胞的IC50分别为266,161.3 mg/L;在农药的推荐使用量下,咯菌腈和辛菌胺醋酸盐的抑菌率分别为25.46%,0%,对应的细胞活力均低于50%,比发酵液毒性大且抑菌率低。可见,2种拮抗菌发酵上清液理化性质稳定,比农药安全性高,有突出的抑菌优势,具有生防潜力。
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