展示p53蛋白表位噬菌体phage-SD的制备及应用 |
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作者姓名: | 刘兴友 孙梦月 潘鹏涛 刘国伟 |
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作者单位: | 河南师范大学 生命科学学院,河南 新乡 453007;新乡学院 生命科学与基础医学学院,河南 新乡 453003;河南师范大学 生命科学学院,河南 新乡 453007;新乡学院 生命科学与基础医学学院,河南 新乡 453003;新乡市中心医院,河南 新乡 453099 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(81702074);;河南省科技攻关计划项目(212102110160);;河南省高等学校重点科研项目(22A180008); |
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摘 要: | [目的]利用噬菌体展示技术制备一种可用于检测血清p53抗体的噬菌体.[方法]利用基因工程手段将编码p53蛋白N端20~31位的多肽SD的基因克隆到丝状噬菌体载体fADL-le的pIII蛋白基因中,制备展示该外源肽的噬菌体phage-SD并进行了Western blot鉴定.在此基础上,分别以phage-SD和重组p53蛋白为检测抗原,利用ELISA方法对乳腺癌患者血清p53抗体进行检测.[结果]成功制备出能特异性识别血清p53抗体的噬菌体phage-SD.ELISA检测结果表明,60例乳腺癌患者中phage-SD检测到13例p53抗体阳性患者,检出率为21.67%,与重组p53蛋白检测效率(21.67%)一致.[结论]成功制备一种灵敏度高、特异性强的可用于血清p53抗体检测的噬菌体phage-SD,为新型血清p53抗体检测试剂的开发及临床应用奠定基础.
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关 键 词: | 噬菌体展示 丝状噬菌体 p53抗体 ELISA |
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