| Rac1突变重组体的构建及对JAK/STAT信号通路的影响 |
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| 引用本文： | 尚娇娇,胡玲,方健,叶守东,孙敏.Rac1突变重组体的构建及对JAK/STAT信号通路的影响[J].安徽大学学报(自然科学版),2023(1):85-92. |
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| 作者姓名： | 尚娇娇 胡玲 方健 叶守东 孙敏 |
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| 作者单位： | 安徽大学生命科学学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(31670361)； |
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| 摘 要： | 通过构建Rac1突变体，研究Rac1激活对肾小球系膜细胞(MES)JAK2/STAT3信号通路的影响.以Rac1目的基因为模板，在引物中设计突变，扩增突变体Rac1(G12V)的目的基因，与PiggyBac(PB-FLAG)载体质粒连接，构建突变重组体PB-Rac1(G12V),并运用脂质体核酸试剂转染系膜细胞.比较正常组、Rac1(G12V)突变组中系膜细胞的ROS含量及NADPH氧化酶活性；Elisa法检测细胞因子TGF-β表达水平；Western blot法检测系膜细胞中JAK2/STAT3信号及FN蛋白的表达.结果表明，成功构建了Rac1(G12V)持续磷酸化突变体并在MES细胞中表达，与正常组相比，Rac1(G12V)激活突变MES细胞NADPH氧化酶的活性和ROS含量明显增加；JAK2/STAT3信号通路激活，TGF-β和FN表达明显增加.Rac1能激活系膜细胞氧化应激和JAK2/STAT3信号通路，并促进TGF-β及FN的表达.
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| 关 键 词： | Rac1 肾小球系膜细胞 氧化应激 JAK/STAT信号通路 |
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