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| 用金属螯合柱一步纯化和复性重组人血管生长抑制因子(rhB) | |
| 引用本文： | 焦丽华,吴纬,陈静娴,宋宁,王憬惺.用金属螯合柱一步纯化和复性重组人血管生长抑制因子(rhB)[J].四川大学学报(自然科学版),2002(Z1). |
| 作者姓名： | 焦丽华 吴纬 陈静娴 宋宁 王憬惺 |
| 摘 要： | rhB基因表达产物在大肠杆菌中以不溶性包涵体形式存在 .利用其产物N端携带 6个连接的组氨酸与金属螯合层析介质中的镍离子的亲和性 ,应用Ni -NTA金属螯合层析在蛋白质变性条件下进行纯化 ,并对纯化样品的复性进行了研究 ,分析和比较了不同复性方法和复性条件对其复性率的影响 .实验结果表明 ,在变性条件下经纯化的样品在Ni柱上不经洗脱 ,用 8.0mol/L～ 1.0mol/L尿素梯度洗涤可使样品在柱上直接复性 .用该法除了可有效地提高复性率外 ,还可使整个纯化过程变得简单、快速和高效 .一步层析即可得到高纯度的且具有生物活性的rhB . |
| 关 键 词： | 包涵体 纯化 复性 |