| 结核分枝杆菌H37Rv组氨醇脱氢酶基因的克隆、表达及酶学性质分析 |
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| 引用本文： | 刘瑞卿,金瑞良,王虹军,徐胜凤,曹健,淳于利娟,许云敏,王洪海. 结核分枝杆菌H37Rv组氨醇脱氢酶基因的克隆、表达及酶学性质分析[J]. 复旦学报(自然科学版), 2007, 46(3): 384-389 |
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| 作者姓名： | 刘瑞卿 金瑞良 王虹军 徐胜凤 曹健 淳于利娟 许云敏 王洪海 |
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| 作者单位： | 复旦大学,生命科学学院,遗传学研究所,遗传工程国家重点实验室,上海,200433;河南工业大学,生物工程学院,郑州,450052;复旦大学,生命科学学院,遗传学研究所,遗传工程国家重点实验室,上海,200433;河南工业大学,生物工程学院,郑州,450052 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金 , 国家重点基础研究发展计划(973计划) |
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| 摘 要： | 以结核分枝杆菌H37Rv基因组为模板,扩增hisD基因,构建pET-28a-HDH重组质粒;转化重组质粒到E.coli BL21(DE3)并诱导表达,纯化可溶性的结核分枝杆菌L-组氨醇脱氢酶(HDH),并对其性质进行研究,结果表明:重组结核分枝杆菌L-组氨醇脱氢酶能以L-组氨醇和NAD 为底物催化L-组氨醇生成L-组氨酸;该酶的最适pH值为8.3,最适温度为45℃,比活力为1.788 U/mg;Mn2 ,Ca2 ,Zn2 ,Co2 等对酶促反应有激活作用;底物NAD 和L-组氨醇的米氏常数分别为0.9765 mmol/L和2.755μmol/L;25℃时重组蛋白的二级结构中有20.5%的α-螺旋,40.9%β-折叠,4.2%β-转角,34.3%无规卷曲.
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| 关 键 词： | 结核分枝杆菌 L-组氨醇脱氢酶 NADH L-组氨醇 |
| 文章编号： | 0427-7104（2007）03-0384-06 |
| 修稿时间： | 2007-01-17 |
Cloning and Expression of Histidinol Dehydrogenase Gene from Mycobacterium tuberculosis H37Rv and Properties of the Recombinant Histidinol Dehydrogenase |
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| LIU Rui-qing,JIN Rui-liang,WANG Hong-jun,XU Sheng-feng,CAO Jan,CHUNYU Li-juan,XU Yun-min,WANG Hong-hai. Cloning and Expression of Histidinol Dehydrogenase Gene from Mycobacterium tuberculosis H37Rv and Properties of the Recombinant Histidinol Dehydrogenase[J]. Journal of Fudan University(Natural Science), 2007, 46(3): 384-389 |
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| Authors: | LIU Rui-qing JIN Rui-liang WANG Hong-jun XU Sheng-feng CAO Jan CHUNYU Li-juan XU Yun-min WANG Hong-hai |
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| Affiliation: | 1. State Key Laboratory of Genetic Engineering, Institute of Genetics, School of Life Sciences, Fudan University, Shanghai 200433, China ; 2. College of Bizengneering, Honah University of Technology, Zhengzhou 450052, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Mycobacterium tuberculosis histidinol dehydrogenase NADH L-histidinol |
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