| 抗Der p 2单克隆抗体细胞株的建立与鉴定 |
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| 作者姓名： | 张红绪 胡萍 胡庚熙 刘丹丹 邢文会 |
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| 作者单位： | 河南师范大学,生命科学学院,河南,新乡,453007;中国科学院 上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所,上海,200031 |
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| 基金项目： | 河南省科技攻关项目 , 河南省自然科学基金 , 河南省动物重点学科资助 |
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| 摘 要： | 目的:建立Der p 2(屋尘螨Ⅱ类变应原)杂交瘤细胞株,并对其分泌的Der p 2单克隆抗体进行鉴定.方法:用重组Der p 2蛋白作为免疫原,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0小鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选和3次克隆化,制备出单克隆抗体.采用间接ELISA法、Western blot法确定单克隆抗体的免疫球蛋白的类型和亚类、相对亲和力、特异性,对单克隆抗体进行鉴定.结果:获得3株能稳定分泌高效价Der p 2单克隆抗体的杂交瘤细胞株,1B6为IgG1类,1G11、4B1为IgG2a类.间接ELISA法检测细胞上清效价为104~105,腹水效价为105~106.Westernblot试验证明3株单抗与Der p 2蛋白均有特异性反应.结论:成功制备了3株抗Der p 2的单克隆抗体,均具有良好的特异性和亲和力,为进一步建立Der p 2蛋白检测和纯化的方法奠定了基础.
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| 关 键 词： | Der p 2 单克隆抗体 杂交瘤 细胞融合 |
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