| HEK293 PEAK瞬转快速表达抗体蛋白平台的建立 |
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| 引用本文： | 颜为海,赵清霞,陈红岩.HEK293 PEAK瞬转快速表达抗体蛋白平台的建立[J].安徽大学学报(自然科学版),2014(2). |
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| 作者姓名： | 颜为海 赵清霞 陈红岩 |
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| 作者单位： | 复旦大学生命科学学院;遗传工程国家重点实验室;和卓生物科技(上海)有限公司;上海药明康德新药开发有限公司; |
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| 摘 要： | 将HEK293 PEAK细胞用Gibco FreeStyleTM293表达培养液进行无血清悬浮驯化培养,获得无血清悬浮培养的HEK293 PEAK细胞,并经有限稀释法获得细胞亚克隆,建立抗体瞬转表达的工程细胞株.用转染试剂PEI将质粒转入该细胞株中表达抗体.通过优化质粒DNA与转染试剂PEI的比例,质粒与转染试剂的比例为1∶2时,转染效率最佳,并对瞬转表达抗体进行鉴定和活性分析,确认获得具有生物活性的抗体(Herceptin),抗体分子量约150 kD,结果表明已成功建立了以无血清悬浮培养的HEK293 PEAK细胞为宿主细胞的瞬转快速表达抗体蛋白平台.
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| 关 键 词： | HEK PEAK细胞 瞬转 抗体蛋白 |
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