| 集胞藻PCC6803基因slr2049定点突变及其体内重组功能研究 |
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| 引用本文： | 朱,超,陈思礼.集胞藻PCC6803基因slr2049定点突变及其体内重组功能研究[J].华中师范大学学报(自然科学版),2013,47(3):397-403. |
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| 作者姓名： | 朱 超 陈思礼 |
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| 作者单位： | 中南民族大学生命科学学院,武汉,430074 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目，中央高校自然科学基金项目，微生物与生物转化中南民族大学重点实验室项目 |
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| 摘 要： | 在Synechocystis sp.PCC 6803中找到与cpeS具有高度同源性的基因slr2049.采用PCR从Synechocystis sp.PCC 6803DNA中扩增出cpcB,slr2049,ho1,pcyA4个基因;定点突变试剂盒构建8个突变体slr2049(H21S)、slr2049(L23S)、slr2049(A24S)、slr2049(F25S)、slr2049(W72L)、slr2049(G84S)、slr2049(R107S)和slr2049(Y124S);将它们与表达载体pCDFDuet-1和pET-23a(+)相连构建pCDF-cpcB-slr2049野生型和pCDF-cpcB-slr2049突变体以及pET-ho1-pcyA,进行高效表达,用亲和层析柱纯化,产物用SDS-PAGE和光谱检测.研究表明:突变体slr2049(H21S)、slr2049(L23S)、slr2049(F25S)、slr2049(W72L)、slr2049(G84S)、slr2049(Y124S)与野生型slr2049催化获得的重组藻蓝蛋白β亚基具有与天然藻蓝蛋白β亚基相似的光谱特性,其他2个突变体slr2049(A24S)和slr2049(R107S)催化的产物则没有光谱特性.由此推测,第24位丙氨酸和第107位精氨酸可能是slr2049酶活性的必需氨基酸,其所处位置是slr2049的活性位点.
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| 关 键 词： | 色素裂合酶 藻蓝蛋白-β亚基 定点突变 体内重组 |
Site-directed mutation of the gene slr2049 from Synechocy-stis sp.PCC 6803 and the study on the function |
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| ZHU Chao
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CHEN Sili.Site-directed mutation of the gene slr2049 from Synechocy-stis sp.PCC 6803 and the study on the function[J].Journal of Central China Normal University(Natural Sciences),2013,47(3):397-403. |
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| Authors: | ZHU Chao CHEN Sili |
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| Institution: | (College of Life Science,South-Central University for Nationalities,Wuhan 430074) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | bilin lyase phycocyanin β-subunit site-directed mutant recombinant |
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