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表达Kallistatin的9型重组腺相关病毒的制备及其体外表达效率
引用本文:王峰,许瑞安. 表达Kallistatin的9型重组腺相关病毒的制备及其体外表达效率[J]. 华侨大学学报(自然科学版), 2013, 0(1): 68-71
作者姓名:王峰  许瑞安
作者单位:华侨大学分子药物研究院;华侨大学分子药物教育部工程研究中心
基金项目:国家自然科学基金资助项目(81072578);福建省自然科学基金资助项目(2010J05026);福建发改委项目(20090205);福建省厦门市科技计划项目(3502Z20053046)
摘    要:采用三质粒磷酸钙共转染生产系统,制备出可以表达内源性抗肿瘤血管生成因子(Kallistatin)的9型重组腺相关病毒(rAAV2/9)和2型重组腺相关病毒(rAAV2/2).rAAV经银染法鉴定其纯度;采用WesternBlotting法比较rAAV2/9和rAAV2/2外壳蛋白的大小;qPCR方法检测rAAV的滴度.使用rAAV2/9-Kal-listatin和rAAV2/2-Kallistatin分别感染人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)后,RT-PCR和ELISA法分别检测Kallistatin的mRNA和蛋白表达水平.结果表明:纯化的病毒纯度达到98%以上;rAAV9外壳蛋白比rAAV2的大.感染HUVEC后,rAAV2/9介导Kallistatin在mRNA和蛋白表达水平都要比rAAV2/2高.

关 键 词:9型重组腺相关病毒  Kallistatin  表达效率  人脐静脉血管内皮细胞

Production and Expression Efficiency in Vitro of Recombinant Adeno-Associated Virus 9 Mediating Kallistatin
WANG Feng,XU Rui-an. Production and Expression Efficiency in Vitro of Recombinant Adeno-Associated Virus 9 Mediating Kallistatin[J]. Journal of Huaqiao University(Natural Science), 2013, 0(1): 68-71
Authors:WANG Feng  XU Rui-an
Affiliation:1,2(1.Institute of Molecular Medicine,Huaqiao University,Quanzhou 362021,China; 2.Engineering Research Center of Molecular Medicine,Ministry of Education,Huaqiao University,Quanzhou 362021,China)
Abstract:
Keywords:
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