| 表达Kallistatin的9型重组腺相关病毒的制备及其体外表达效率 |
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| 引用本文： | 王峰,许瑞安.表达Kallistatin的9型重组腺相关病毒的制备及其体外表达效率[J].华侨大学学报(自然科学版),2013(1):68-71. |
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| 作者姓名： | 王峰 许瑞安 |
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| 作者单位： | 华侨大学分子药物研究院;华侨大学分子药物教育部工程研究中心 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(81072578);福建省自然科学基金资助项目(2010J05026);福建发改委项目(20090205);福建省厦门市科技计划项目(3502Z20053046) |
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| 摘 要： | 采用三质粒磷酸钙共转染生产系统,制备出可以表达内源性抗肿瘤血管生成因子(Kallistatin)的9型重组腺相关病毒(rAAV2/9)和2型重组腺相关病毒(rAAV2/2).rAAV经银染法鉴定其纯度;采用WesternBlotting法比较rAAV2/9和rAAV2/2外壳蛋白的大小;qPCR方法检测rAAV的滴度.使用rAAV2/9-Kal-listatin和rAAV2/2-Kallistatin分别感染人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)后,RT-PCR和ELISA法分别检测Kallistatin的mRNA和蛋白表达水平.结果表明:纯化的病毒纯度达到98%以上;rAAV9外壳蛋白比rAAV2的大.感染HUVEC后,rAAV2/9介导Kallistatin在mRNA和蛋白表达水平都要比rAAV2/2高.
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| 关 键 词： | 9型重组腺相关病毒 Kallistatin 表达效率 人脐静脉血管内皮细胞 |
Production and Expression Efficiency in Vitro of Recombinant Adeno-Associated Virus 9 Mediating Kallistatin |
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| WANG Feng,XU Rui-an.Production and Expression Efficiency in Vitro of Recombinant Adeno-Associated Virus 9 Mediating Kallistatin[J].Journal of Huaqiao University(Natural Science),2013(1):68-71. |
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| Authors: | WANG Feng XU Rui-an |
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| Institution: | 1,2(1.Institute of Molecular Medicine,Huaqiao University,Quanzhou 362021,China; 2.Engineering Research Center of Molecular Medicine,Ministry of Education,Huaqiao University,Quanzhou 362021,China) |
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