| 临床分离MRSA中氨基糖苷类双功能修饰酶AAC(6)′-APH(2″)的克隆表达与活性测定 |
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| 引用本文： | 王春霞, 陈俊升, 邵雷, 陈代杰, 李继安.临床分离MRSA中氨基糖苷类双功能修饰酶AAC(6)′-APH(2″)的克隆表达与活性测定[J].上海师范大学学报(自然科学版),2011,40(3):301-305. |
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| 作者姓名： | 王春霞 陈俊升 邵雷 陈代杰 李继安 |
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| 作者单位： | 1. 上海师范大学生命与环境科学学院,上海,200234
2. 上海医药工业研究院 生物部,上海,200040 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30801449); 国家“重大新药创制”科技重大专项项目(2009ZX09301-007); 上海市自然科学基金项目(09ZR1430800) |
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| 摘 要： | 双功能酶AAC(6′)-APH(2″)是一种重要的氨基糖苷类抗生素钝化酶,从临床分离出的6株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的总DNA中克隆得到AAC(6′)-APH(2″)基因,将该基因插入质粒pET-28a中构建表达载体,然后将该重组质粒转入大肠杆菌BL21进行异源表达,在IPTG的诱导下产生大量可溶性目标重组蛋白,该重组蛋白经亲和层析分离纯化,SDS-PAGE鉴定纯度大于90%;建立了此双功能酶的体外测活方法,为建立氨基糖苷类抗生素双功能酶抑制剂筛选模型奠定基础.
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| 关 键 词： | 氨基糖苷类抗生素 耐甲氧西林金葡菌 双功能酶 异源表达 |
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