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稳定表达绿色荧光蛋白的B16细胞株的建立及其生物学特性研究
引用本文:张弘,丁晓燕,方廖琼,王智彪,乔海,刘阳,张小梅. 稳定表达绿色荧光蛋白的B16细胞株的建立及其生物学特性研究[J]. 世界科技研究与发展, 2011, 33(1): 137-140
作者姓名:张弘  丁晓燕  方廖琼  王智彪  乔海  刘阳  张小梅
作者单位:重庆医科大学生物医学工程系,省部共建超声医学工程国家重点实验室,超声医学工程重庆市市级重点实验室,重庆,400016
基金项目:重庆市自然科学基金计划项目,重庆市教育委员会科学技术研究项目
摘    要:目的建立稳定表达绿色荧光蛋白的B16黑色素瘤细胞株,并研究其生物学特性。方法转染增强型绿色荧光蛋白基因入B16细胞,经G418联合单克隆培养,筛选阳性细胞。激光共聚焦荧光显微镜观察EGFP阳性细胞形态;流式细胞仪检测细胞内EGFP基因的蛋白表达;RT-PCR检测EGFP基因的mRNA表达;皮下接种及MTF法评价细胞在体内外的生长特性。结果流式细胞仪检测表达绿色荧光蛋白的细胞阳性率为99.81%,RT-PCR检测到EGFP基因的mRNA阳性表达。生长曲线显示其体外增殖趋势与B16相似,EGFP—B16体内成瘤速度较B16慢(P〈0.05)。结论稳定表达绿色荧光蛋白的EGFP—B16细胞株成功建立,可作为作为进一步研究恶性黑色素瘤的材料。

关 键 词:稳定转染  增强型绿色荧光蛋白  B16黑色素瘤细胞  基因

Researches on a Stable EGFP-B16 Cell Line and Its Characterization
ZHANG Hong,DING Xiaoyan,FANG Liaoqiong,WANG Zhibiao,QIAO Hai,LIU Yang,ZHANG Xiaomei. Researches on a Stable EGFP-B16 Cell Line and Its Characterization[J]. World Sci-tech R & D, 2011, 33(1): 137-140
Authors:ZHANG Hong  DING Xiaoyan  FANG Liaoqiong  WANG Zhibiao  QIAO Hai  LIU Yang  ZHANG Xiaomei
Affiliation:( State Key Laboratory of Ultrasound Engineering in Medicine Co-founded by Chongqing and the Ministry of Science and Technology, Chongqing Key laboratory of Ultrasound in Medicine and Engineering, Department of Biomedical Engineering, Chongqing Medical University, Chongqing 400016)
Abstract:
Keywords:stable transtection  EGFP  B16 melanoma cell line  gene
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