| 快速简单组织定位甘蔗RSD致病菌Lxx的原位PCR方法 |
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| 引用本文： | 胡敏,汪文华,何恩铭,孟红岩,郭莺.快速简单组织定位甘蔗RSD致病菌Lxx的原位PCR方法[J].华侨大学学报(自然科学版),2018(2). |
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| 作者姓名： | 胡敏 汪文华 何恩铭 孟红岩 郭莺 |
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| 作者单位： | 华侨大学化工学院;福建省亚热带植物研究所福建省生理生化重点实验室 |
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| 摘 要： | 提出对甘蔗冰冻切片中甘蔗宿根矮化病(RSD)致病菌Lxx(Leisonia xyli subsp. xyli)进行定位的原位多聚酶链式反应(in situ PCR)方法,为Lxx与甘蔗互作致病机理研究提供有效的实验手段.以染RSD甘蔗品种Badila及其健康株为材料取样制作冰冻切片,切片经溶菌酶消化后,利用病原菌Lxx 16S~23S rDNA内部转录间隔区(ITS)特异性引物进行原位PCR扩增,并对随机参入扩增片段的与地高辛-11-dUTP进行免疫组化,建立甘蔗样品冰冻切片中直接原位PCR方法.结果表明:直接原位PCR对RSD蔗株茎样品切片显色为阳性,阳性信号出现于甘蔗茎部的木质部、韧皮部,而健康蔗株茎样品无信号,方法特异性较好.
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