利用双启动子质粒在毕赤酵母中高效表达人FGF1 |
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作者单位: | ;1.西北大学化工学院 |
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摘 要: | 基于p PIC9K构建了同时含有AOX1和FLD1的双启动子质粒,并成功转入毕赤酵母GS115中,建立了一个新型的全长人活性FGF1表达系统。测序结果和SDS-PAGE显示质粒构建成功,两种启动子可同时被甲醇诱导。液质联用分析表明,目的蛋白的氨基酸组成与人源性FGF1基本一致,且在生物活性测定中表现出良好的生物相容性。经过大规模发酵与凝胶过滤层析,重组FGF1蛋白的产量为197 mg/L,约为当前报道的最高表达水平的两倍,且纯度达到97%。
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关 键 词: | 双启动子质粒 FGF1 毕赤酵母 高效表达 纯化 |
High-level production of active human fibroblast growth factor 1 using a dual-promoter vector in Pichia pastoris |
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