| 尿酸酶突变体的高通量筛选方法 |
| |
| 引用本文： | 廖娟,刘红博,高昂,杨晓兰,李元丽,廖飞. 尿酸酶突变体的高通量筛选方法[J]. 西北大学学报(自然科学版), 2015, 0(1): 84-89 |
| |
| 作者姓名： | 廖娟 刘红博 高昂 杨晓兰 李元丽 廖飞 |
| |
| 作者单位： | 重庆医科大学附属永川医院中心实验室;重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(30672009);教育部新世纪优秀人才支持计划基金资助项目(NCET-09-0928);重庆市科委重点基金资助项目(CSTC2011BA5039) |
| |
| 摘 要： | 建立一种尿酸酶突变体的高通量筛选方法。将野生型苛求芽孢杆菌尿酸酶及其突变体的表达载体转入大肠杆菌,每个克隆诱导培养后超声裂解上清液为样品,全自动酶标仪测定293 nm光吸收,并分析反应启动后8~28 min的数据计算酶活性,Bradford法测定总蛋白;ROC比较用酶活性或比活性识别阳性突变体的可靠性。任2种突变体酶活性或比活性比值2时,ROC分析曲线下面积接近1;当酶活性或比活性仅增加50%时,分析比活性所得曲线下面积比分析酶活性更大,将ROC分析比活性提高近1倍。突变体敏感度达90%时,比活性为判断阳性突变体阈值,其相当于以起始物比活性均值加1.7倍标准差;此阈值能用于高通量筛选变体库中比活性增加1倍以上的阳性突变体。
|
| 关 键 词： | 尿酸酶 比活性 阳性突变体 通用阈值 |
A high- throughput method for recognizing Uricase mutants of higher activity |
| |
| LIAO Juan;LIU Hong-bo;GAO Ang;YANG Xiao-lang;LI Yuan-li;LIAO Fei. A high- throughput method for recognizing Uricase mutants of higher activity[J]. Journal of Northwest University(Natural Science Edition), 2015, 0(1): 84-89 |
| |
| Authors: | LIAO Juan LIU Hong-bo GAO Ang YANG Xiao-lang LI Yuan-li LIAO Fei |
| |
| Affiliation: | LIAO Juan;LIU Hong-bo;GAO Ang;YANG Xiao-lang;LI Yuan-li;LIAO Fei;Central Laboratory,of Yongchuan Hospital ,Chongqing Medical University;Key Laboratory of Clinical Laboratory Diagnostics of the Education Ministry,College of Laboratory Medicine,Chongqing Medical University; |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
|
