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ARMS实时PCR基因分型特异性的研究
引用本文:郑薇薇,梁基选,李庆阁. ARMS实时PCR基因分型特异性的研究[J]. 厦门大学学报(自然科学版), 2005, 44(Z1): 135-139
作者姓名:郑薇薇  梁基选  李庆阁
作者单位:1. 厦门大学生命科学学院,生物医学系,细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室
2. 厦门大学医学院,抗癌研究中心,福建,厦门,361005
基金项目:国家自然科学基金(30170834)和福建省自然科学基金重点项目(C0220002)资助
摘    要:以原癌基因K-ras基因12位密码子的4种基因型(野生型为GGT,突变型为AGT、TGT、CGT)质粒DNA为研究模型,采用SYBR GreenⅠ为实时PCR指示剂,进行ARMS实时PCR基因分型特异性的研究.结果表明在和模板匹配的ARMS引物3′端附近引入故意错配碱基,将ARMS引物浓度稀释10倍,并对传统三步PCR循环进行改良,即根据目的产物和引物二聚体的熔点差异,在传统延伸步骤之后增加一步恒温80℃检测荧光步骤,可消除引物二聚体的影响,使ARMS引物的特异性增强,得到清晰的基因分型结果.实验表明这种基于SYBR GreenⅠ的ARMS实时PCR基因分型方法,无需合成探针,实验设计简单,是一种快速、简便、经济、特异性好的基因分型方法,可推广用于其他基因的分型,并可望成为应用于临床的基因诊断技术之一.

关 键 词:实时PCR  ARMS  基因分型
文章编号:0438-0479(2005)Sup-0135-05
修稿时间:2005-02-28

Study on the Specificity of ARMS Real-time PCR Genotyping
ZHENG Wei-wei,LIANG Ji-xuan,LI Qing-ge. Study on the Specificity of ARMS Real-time PCR Genotyping[J]. Journal of Xiamen University(Natural Science), 2005, 44(Z1): 135-139
Authors:ZHENG Wei-wei  LIANG Ji-xuan  LI Qing-ge
Abstract:
Keywords:
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