| 布鲁氏菌bp26基因的原核表达及BP26-间接ELISA方法的初步建立 |
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| 引用本文： | 唐利燕,陈创夫,王远志,张辉,张红星.布鲁氏菌bp26基因的原核表达及BP26-间接ELISA方法的初步建立[J].石河子大学学报,2009,27(4):437-440. |
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| 作者姓名： | 唐利燕 陈创夫 王远志 张辉 张红星 |
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| 作者单位： | 唐利燕,陈创夫,张辉(石河子大学动物科技学院,石河子,8321103);王远志(石河子大学医学院,石河子,832002);张红星(石河子大学生命科学院,石河子,832003) |
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| 基金项目： | 973 计划前期研究专项，国际科技合作项目，国家自然科学基金项目，国家自然科学基金项目 |
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| 摘 要： | 为了表达并纯化布鲁氏菌BP26蛋白作为包被抗原，建立间接ELISA检测方法。方法：从布鲁氏菌疫苗株M5—90克隆bp26基因，在大肠杆菌E．coli B121（DE3）中表达，纯化BP26蛋白，进行SDS．PAGE、Western—blot检测，将纯化的BP26蛋白包被ELISA板，建立检测布鲁氏菌病的间接ELISA方法，用该方法检测42份绵羊血清，结果与标准试管凝集试验（SAT）进行比较。结果显示：正确表达并纯化了BP26蛋白，布鲁氏菌标准试管凝集试验检测的阳性率为30．85％（13／42）；间接ELISA方法检测的阳性率为35．71％（15／42），二者阳性符合率为86．67％（13／15）。结论表达、纯化的BP26蛋白能够与布鲁氏菌阳性血清特异性结合，建立的ELISA方法比SAT方法更敏感。为以后M5-90疫苗株bp26基因缺失苗的应用提供配套性血清学检测奠定基础。
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| 关 键 词： | 布鲁氏菌 BP26蛋白 间接ELISA 标准试管凝集实验 |
Expression of Brucella bp26 Gene and BP26 Protein Used as the Diagnostic Antigen in Indirect ELISA |
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| TANG liyan,CHEN Chuangfu,WANG Yuanzhi,ZHANG Hui,ZHANG Hong xing.Expression of Brucella bp26 Gene and BP26 Protein Used as the Diagnostic Antigen in Indirect ELISA[J].Journal of Shihezi University(Natural Science),2009,27(4):437-440. |
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| Authors: | TANG liyan CHEN Chuangfu WANG Yuanzhi ZHANG Hui ZHANG Hong xing |
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| Institution: | 1 College of Animal Scicence & Technology;Shihezi University;Shihezi 832003;China;2 College of Medcine;Shihezi 832002;3 College of Life Sciences;China |
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| Abstract: | To investigate the value of the recombinant BP26 protein in the serological diagnosis of sheep brucellosis caused by Brucella melitensis,recombinant BP26 protein was produced in Escherichia Coli and purified for use in an indirect enzyme-linked immunosorbent assay(I-ELISA).In the study,one target fragment bp26 gene was amplified via PCR from the vaccine strain M5-90 and expressed in E.Coli.The results were compared with standard tube agglutination test(STAT) with 42 serum samples.It was found that the posit... |
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| Keywords: | Brucella BP26 indirect ELISA standard tube agglutination test |
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