| 葡激酶突变体Y1-Sak的体外变复性研究 |
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| 引用本文： | 贺进田,王改珍,宋后燕.葡激酶突变体Y1-Sak的体外变复性研究[J].河北师范大学学报(自然科学版),2006,30(4):459-463. |
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| 作者姓名： | 贺进田 王改珍 宋后燕 |
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| 作者单位： | 河北师范大学,生命科学学院,河北,石家庄,050016;复旦大学,教育部分子医学重点实验室,上海,200032;河北科技大学,环境科学与工程学院,河北,石家庄,050018;复旦大学,教育部分子医学重点实验室,上海,200032 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划) |
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| 摘 要： | 具有低免疫原性的双功能葡激酶突变体Y1-Sak(△15,S16K,K74A,E75A,R77A,K109R,F111D)在大肠杆菌中的表达产物为包涵体,必须进行体外变复性才能得到活性.详细研究了复性方式、pH、温度、复性的初始蛋白浓度和添加L-精氨酸对Y1-Sak的体外变复性的影响,发现复性温度和添加的L-精氨酸对Y1-Sak的复性有重要的影响.经过工艺优化后,Y1-Sak的纯化活性回收率达到40%左右,蛋白比活性由20 kU/mg提高到53 kU/mg.用动态光散射分析发现,工艺优化后复性的高比活性Y1-Sak的水合动力学半径与野生型葡激酶相近,分子基本处于单体状态.
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| 关 键 词： | 葡激酶突变体 复性 包涵体 |
| 文章编号： | 1000-5854(2006)04-0459-05 |
| 收稿时间： | 2005-12-17 |
| 修稿时间： | 2006-01-17 |
Refolding of Recombinant Staphylokinase Variant Y1-Sak from Escherichia coli |
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| HE Jin-tian,WANG Gai-zhen,SONG Hou-yan.Refolding of Recombinant Staphylokinase Variant Y1-Sak from Escherichia coli[J].Journal of Hebei Normal University,2006,30(4):459-463. |
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| Authors: | HE Jin-tian WANG Gai-zhen SONG Hou-yan |
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| Institution: | 1. College of Life Science,Hebei Normal University,Hebei Shijiazhuang 050016,China; 2. Key Laboratory of Molecular Medicine, Ministry of Education. Fudan University, Shanghai 200032, China; 3. College of Environmental Science and Engineering,Hebei Science and Technology University, Hebei Shijiazhuang 050018.China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | staphylokinase refolding inclusion body |
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