红平红球菌LSSE8-1脱硫代谢及其相关脱硫基因的比较 |
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作者姓名: | 缑仲轩 罗明芳 李信 邢建民 刘会洲 |
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作者单位: | 中国科学院过程工程研究所分离科学与工程实验室,生化工程国家重点实验室,北京,100080 |
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基金项目: | 本工作为国家重点基础研究发展规划(批准号:G2000048004)、国家高技术研究发展计划(批准号:2002AA302211)、国家自然科学基金(批准号:20206032)资助项目. |
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摘 要: | 红平红球菌(Rhodococcus erythropolis) LSSE8-1是从我国贵州赤水气田中筛选分离的一株专一性脱硫菌. 该菌能选择性地氧化二苯并噻吩(DBT)生成2-羟基联苯(HBP). 利用DBTO2(dibenzothiophene 5,5-dioxide)作底物既生成HBP又生成DBT, 表明从DBT到DBTO2这一步反应在细胞水平是可逆的. 同时以DBT为对照, 0.01~0.4 mmol/L DBTO2均对细胞的生长表现出毒害作用, 这就解释了脱硫反应中DBTO2不积累的问题. 在溶菌酶处理的基础上, 用碱液裂解法提取LSSE8-1质粒作模板, 选择Rhodococcus erythropolis IGTS8脱硫基因的保守区设计引物, 用PCR的方法扩增分别得到1.3, 1.0和1.2 kb三段脱硫基因片段. 选用pGEM-T easy载体, E. coli. DH5α为受体菌, 克隆这三段基因后, 测序结果表明这三段脱硫基因高度保守. 与IGTS8的相关脱硫基因相比较, dszA和dszB的同源性都是100%, dszC的同源性是99%.
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关 键 词: | 二苯并噻吩 四硫途径 中间产物 基因序列 脱硫 红平红球菌 |
收稿时间: | 2003-05-19 |
修稿时间: | 2003-05-19 |
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