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B淋巴细胞刺激因子基因的克隆及在大肠杆菌中的高效表达
引用本文:王锦之,周卿,周宇荀,马昱澍,魏东芝.B淋巴细胞刺激因子基因的克隆及在大肠杆菌中的高效表达[J].华东理工大学学报(自然科学版),2005,31(2):249-252.
作者姓名:王锦之  周卿  周宇荀  马昱澍  魏东芝
作者单位:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海,200237;华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海,200237;华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海,200237;华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海,200237;华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海,200237
摘    要:聚合酶链式反应(PCR)扩增获得了编码BLys(134—285AA)的cDNA片段,该片段以限制性内切酶BglⅡ和HindⅢ双酶切插入pET32a载体。测序表明除(ATA^263→ATG^263)突变并导致了氨基酸(1263M)突变外,其余序列与Genbank报道的序列一致。蛋白表达用异丙基-β-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,SDS—PAGE表明:在33ku处有明显的融合蛋白表达,其表达水平高达总茵体蛋白的50%。点印迹证实融合蛋白能与anti—His6Tag抗体反应。生物学活性研究表明BLys协同丝裂霉素能明显地抑制HeLa细胞的生长。

关 键 词:B淋巴细胞刺激因子  大肠杆菌  克隆和表达  丝裂霉素  协同作用
文章编号:1006-3080(2005)02-0249-04
修稿时间:2004年4月7日

Cloning and High-Level Expression of B Lymphocyte Stimulator(Blys) in E. Coli
WANG Jin-zhi,ZHOU Qing,ZHOU Yu-xun,MA Yu-shu,WEI Dong-zhi.Cloning and High-Level Expression of B Lymphocyte Stimulator(Blys) in E. Coli[J].Journal of East China University of Science and Technology,2005,31(2):249-252.
Authors:WANG Jin-zhi  ZHOU Qing  ZHOU Yu-xun  MA Yu-shu  WEI Dong-zhi
Abstract:
Keywords:B lymphocyte stimulator  E  coli  cloning and expression  mitomycin  synergistic effect
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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