| 拟南芥RabA2b互作蛋白的筛选与鉴定 |
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| 引用本文： | 冷琳娜,蒋建军,张弛,王学路,苏伟.拟南芥RabA2b互作蛋白的筛选与鉴定[J].复旦学报(自然科学版),2016(4):471-481. |
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| 作者姓名： | 冷琳娜 蒋建军 张弛 王学路 苏伟 |
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| 作者单位： | 1. 复旦大学生命科学学院植物科学研究所,上海200438;复旦大学遗传工程国家重点实验室,上海200438;2. 复旦大学生命科学学院植物科学研究所,上海200438;复旦大学遗传工程国家重点实验室,上海200438;华中农业大学生命科学技术学院,武汉430070 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目(KRH1322423) |
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| 摘 要： | Rab蛋白家族在调控细胞囊泡的运输过程中发挥着重要作用.拟南芥中存在数量庞大的RabA亚族成员,它们参与调控植物不同阶段的生长发育过程.为了寻找拟南芥RabA亚族下游的调节蛋白或效应蛋白,进而阐明RabA在细胞活动中的角色,本研究选取RabA2b蛋白进行了深入研究.本研究首先构建过表达RabA2b的拟南芥植株,同时结合免疫共沉淀方法和液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)检测到多个Hsp70蛋白家族成员与RabA2b蛋白共沉淀.为了进一步研究Hsp70成员与RabA2b的相互关系,将5个细胞质和细胞核定位的Hsp70s蛋白分别构建于植物表达载体,通过在烟草叶表皮细胞中瞬时表达Hsp70s和RabA2b发现它们共定位于细胞质膜、细胞质以及细胞核周围的丝状结构.同时,体外pull-down实验证明了5个Hsp70s蛋白都能与RabA2b蛋白直接相互作用.此外,双分子荧光互补实验(BiFC)进一步证实了Hsp70s与RabA2b在烟草叶表皮细胞中的相互作用,说明拟南芥中细胞质和细胞核定位的Hsp70s可以作为RabA2b的调节蛋白或效应蛋白一同调控植物的生长发育过程.
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| 关 键 词： | RabA2b Hsp70 相互作用 调节蛋白或效应蛋白 |
Identification and Characterization of RabA2b-interacting Proteins |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | RabA2b Hsp70 interaction regulatory or effector protein |
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