| dsRNA对家蚕核多角体病毒(BmNPV)复制的抑制作用 |
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| 引用本文： | 徐颖,朱成钢,金勇丰,张耀洲.dsRNA对家蚕核多角体病毒(BmNPV)复制的抑制作用[J].科学通报,2004,49(11):1073-1078. |
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| 作者姓名： | 徐颖 朱成钢 金勇丰 张耀洲 |
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| 作者单位： | 1. 浙江大学生物化学研究所,杭州,310029
2. 浙江理工大学生物化学研究所,杭州,310018 |
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| 摘 要： | 以BmNPV复制必需的DNA解旋酶基因和DNA聚合酶基因为靶序列, 人工设计并合成了长度分别为435(Ap1), 300(Ap2)和399 bp(AH)的dsRNAs, 利用TransMessengerTM Transfection Reagent转染家蚕细胞, 研究其对BmNPV复制的抑制效果. 结果表明, 在野生型病毒BmNPV 感染家蚕细胞实验中, Ap2和AH这2个dsRNA能够有效地抑制病毒DNA的复制, 并且在转染dsRNA后第4天抑制效果最佳, 它们使病毒滴度(PFU/mL 值)降低了103~104, 而另外的dsRNA(Ap1)没有明显的抑制效果. RT-PCR和DNA斑点杂交也证实了2种目的基因的表达水平和病毒DNA的量发生了明显的下调. 此外, 用荧光显微镜观察dsRNA在细胞内的定位, 发现在转染24 h后dsRNA开始在细胞核的周围呈不连续的聚集状态.
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| 关 键 词： | BmNPV RNAi dsRNA 复制 抑制 |
| 收稿时间： | 2004-03-04 |
| 修稿时间： | 2004-05-14 |
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