| 人白介素—12（P40）亚基在巴斯德毕赤酵母中的表达 |
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| 引用本文： | 陈新华,杨林,陈曲侯,王章,龙綮新. 人白介素—12（P40）亚基在巴斯德毕赤酵母中的表达[J]. 中山大学学报(自然科学版), 2001, 40(2): 72-74,100 |
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| 作者姓名： | 陈新华 杨林 陈曲侯 王章 龙綮新 |
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| 作者单位： | 1. 中山大学
2. 华中师范大学昆虫研究所, |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金资助项目(960059) |
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| 摘 要： | 运用PCR技术特异性地扩增了IL－12p40亚基cDNA的编码区序列，得到940bp的扩增片段，将其克隆于毕赤酵母(Pichia pastoris)表达载体pPICZαC的ClαⅠ，XbaⅠ位点，构建成重组表达质粒pPICZαC-p40。经LiCI2转化，Zeocin抗性筛选，得到含多拷贝p40基因的酵母工程菌Pichia pastoris X-33/p40,在φ=0.5%甲醇诱导下，p40基因得到了分泌型表达，培养上清的SDS－PAGE及Westem-blot均显示表达产物相对分子质量约44000，与预计大小相符，薄层凝胶扫描结果表明，分泌型表达占培养上清总蛋白量质量的47％。
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| 关 键 词： | IL－12 P40亚基 表达 白介素－12 巴斯德毕赤酵母 PCR技术 免疫调节因子 |
| 文章编号： | 0529-6579(2001)02-0072-04 |
Expression of Human IL-12P40 Subunit in Pichia pastoris |
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| CHEN Xin-hua,YANG Lin,CHEN Qu-Hou,WANG Xun-zhang,LONG qing-xin. Expression of Human IL-12P40 Subunit in Pichia pastoris[J]. Acta Scientiarum Naturalium Universitatis Sunyatseni, 2001, 40(2): 72-74,100 |
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| Authors: | CHEN Xin-hua YANG Lin CHEN Qu-Hou WANG Xun-zhang LONG qing-xin |
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| Affiliation: | CHEN Xin-hua 1,YANG Lin 1,CHEN Qu-hou 2,WANG Xun-zhang 1,LONG Qing-xin 1 |
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| Abstract: | A 940 bp coding fragment of human IL-12 p40 gene was amplified via PCR technique and then cloned into Pichia pastoris expression vector pPICZαC. After transforming the linearized recombinant expression vector into the yeast strain X-33,we obtained the engineered yeast strain Pichia pastoris X-33/p40.The p40 gene was secretly expressed after induction with 0.5% methanol. Both the result of SDS-PAGE and Western-blotting proved a 44 000 protein band in the supernatant of medium. Gel scanning revealed the expression product accounted for 47% of the total supernatant protein. |
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| Keywords: | hIL-12 P40 subunit Pichia pastoris expression |
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