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| Long R^3-IGF-Ⅰ的克隆表达 | |
| 引用本文： | 任慧慧,张喜峰,张妍,刘晓辉,李健.Long R^3-IGF-Ⅰ的克隆表达[J].山西大学学报(自然科学版),2008,31(4). |
| 作者姓名： | 任慧慧 张喜峰 张妍 刘晓辉 李健 |
| 作者单位： | 山西大学,生物技术研究所,化学生物学与分子工程教育部重点实验室,山西,太原,030006 |
| 摘 要： | 在重组质粒pExSecI-IGF-Ⅰ的基础上,采用基因克隆方法合成了长链人胰岛素样生长因子(Long R3-IGF-Ⅰ)基因序列,构建基于该基因的重组原核表达质粒.将重组质粒转入E.coli,并对其表达条件进行了优化.实验结果表明,在37 ℃,IPTG终浓度0.6 mmol/L,诱导3 h条件下,Long R3-IGF-Ⅰ以包涵体形式可得到高效表达.将包涵体变性溶解后通过分离纯化,目的蛋白纯度达到95%以上.通过尿素梯度透析复性法对变性包涵体复性,复性率达到66%. |
| 关 键 词： | 长链人胰岛素样生长因子(LongR3-IGF-Ⅰ) 包涵体 纯化 |
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